cpo000400
Poster
Einfluss etablierter Wachstumsfaktoren auf Proliferation und Apoptose von primären humanen Osteoblastenzellkulturen
Bran
Bran
Gregor M.
GM
Dr. med.
Universitäts-HNO-Klinik, Theodor-Kutzer-Ufer, 68135 MannheimUniversitäts-HNO-Klinik, Mannheim
gregor.bran@hno.ma.uni-heidelberg.de
author
Stern-Sträter
Stern-Sträter
Jens
J
HNO-Klinik Mannheim, Mannheim
author
Bran
Bran
Birgit
B
HNO-Klinik Mannheim, Mannheim
author
Riedel
Riedel
Frank
F
HNO-Klinik Mannheim, Mannheim
author
Gößler
Gößler
Ulrich R.
UR
HNO-Klinik Mannheim, Mannheim
author
German Medical Science GMS Publishing House
Düsseldorf
610
Plastische Chirurgie
20080422
germ
1865-1038
4
GMS Current Posters in Otorhinolaryngology - Head and Neck Surgery
GMS Curr Posters Otorhinolaryngol Head Neck Surg
79. Jahresversammlung der Deutschen Gesellschaft für Hals-Nasen-Ohren-Heilkunde, Kopf- und Hals-Chirurgie
42
Einleitung: Tissue Engineering von Knochen gilt bei der funtkionell-ästhetischen Rekonstruktion ossärer Defekte als vielversprechende Alternative zum autologen Gewebsersatz. Das Regenerationspotential von Osteoblasten wird durch Wachstumsfaktoren beeinflusst. Neben dem Proliferationsverhalten stellt auch die Beurteilung des apoptotischen Ausmaßes bei der Etablierung intakter Zellkulturen eine wichtige Voraussetzung für das klinisch orientierte Tissue Engineering in der rekonstruktiven Kopf-Hals-Chirurgie dar.
Material und Methoden: Primäre Zellkulturen von humanen Osteoblasten (hOB) wurden mit IGF-1, -2 und TNFα angesetzt. Durch immunhistochemische Färbung gegen Osteokalzin wurde der Reinheitsgrad verifiziert. Eine Proliferationsanalyse erfolgte mittels alamarBlue™-Assay nach 1, 5, 10 und 15 Tagen. Die Apoptoseanalyse fand immunhistochemisch (Labelled-Streptavidin-Biotin-Methode) gegen die Regulator-Proteine BAX und BCL-2, den Death Receptor Fas sowie die zentrale Apoptose-Protease Caspase3 statt.
Ergebnisse: Es bildeten sich lückenhafte Zellrasen in Monolayer mit typischer polygonaler Zellform. Das Proliferationsverhalten wies keine signifikanten Unterschiede zwischen den verschiedenen Wachstumsfaktoren in unterschiedlichen Konzentrationen nach Herstellerempfehlungen auf. Im zeitlichen Verlauf konnte eine Veränderung der BCL-2/BAX-Ratio zugunsten des proapoptotischen Regulator-Proteins BAX und eine Zunahme der Caspase 3-Expression beobachtet werden.
Schlussfolgerung: Der Einsatz dieser Wachstumsfaktoren nach den Herstellerangaben zeigte keinen Einfluss auf Proliferation und Apoptose. Gemäß dem Kosten-Nutzen-Effekt liegen Untersuchungen mit erhöhten Konzentrationen außerhalb des Interessenfeldes, so dass sich diese Faktoren zum Einsatz an hOB nicht zu eignen scheinen.
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